Relationship between EBV infection and expression of cellular proteins c-Myc, Bcl-2, and Bax in gastric carcinomas.

BACKGROUND: Epstein-Barr virus (EBV) has been related to tumorigenesis in about 10% of all gastric carcinomas. Several studies have demonstrated strong evidence of its involvement in this process, but most of the mechanisms used by the virus to control this process are still unknown. Previous studies in vitro have indicated a relationship between the virus and some cellular genes involved in processes such as proliferation and apoptosis. OBJECTIVE: The aim of the present study was to investigate a possible EBV-induced tumorigenic pathway involving the cellular proteins Bcl-2, Bax, and c-Myc. STUDY DESIGN: One hundred patients of gastric carcinoma, obtained from 2 hospitals in Fortaleza, Brazil were assessed for the presence of EBV by in situ hybridization, for the expression of Bcl-2, Bax, and c-Myc (nuclear and cytoplasmic staining) proteins by immunohistochemistry techniques, and for the apoptotic index. RESULTS: EBV was detected in 8 (8%) patients showing strong staining situated in the nuclei of the tumor cells, 6 of them displaying a diffuse pattern, and 2 demonstrating a focal pattern of staining. The correlation with the immunohistochemistry results demonstrated that none of the EBV-positive cases exhibited Bcl-2 staining. On the other hand, Bax and c-Myc (nuclear) proteins demonstrated a significant positivity index and staining scores (labeling index and H-score) in the EBV-positive group; however, the values were lower than those obtained in the EBV-negative group, notably for c-Myc nuclear protein. In contrast, the cytoplasmic staining of c-Myc protein revealed slightly higher staining values in the EBV-positive group. The balance between Bcl-2 and Bax proteins demonstrated that the majority of the evaluated cases exhibited apoptosis orientation; however, in 62.5% of the EBV-positive cases neither protein was observed. The average apoptotic index was 4.58%, demonstrating a slightly lower average in the EBV-positive group. CONCLUSIONS: EBV is not related to the overexpression of Bcl-2 and c-Myc (nuclear) in gastric carcinomas; however, the results point to a possible EBV involvement with the transport mechanisms of the nuclear membrane, resulting in cytoplasmic c-Myc accumulation. The suppression of Bax expression could represent an alternative viral mechanism for inhibition of apoptosis.

Biologia molecular do HIV-1 e genética da resistência humana à AIDS / Molecular biology of the HIV-1 and genetics of human resistance to AIDS

A evolução da infecção pelo Vírus da Imunodeficiência Humana Tipo 1 (HIV-1) é influenciada por fatores virais e pelo hospedeiro. Os fatores virais estão relacionados ao subtipo circulante, tropismo,citopatogenicidade, antigenicidade e mutações no genótipo viral que induzem a resistência às drogas utilizadas na terapêutica atual. Neste contexto os padrões de variabilidade de seqüências genômicas do HIV-1 podem ser utilizados como marcadores genéticos para avaliar a tendência da evolução da infecção e a eficácia terapêutica. Por outro lado os fatores relacionados ao hospedeiro incluem genótipo HLA, produção de anticorpos neutralizantes e presença de mutações genéticas que dificultam a interação do vírus com a célula hospedeira. Análises genômicas podem ser úteis no sentido de avaliar presença de fenótipo que predispões à progressão da infecção. Neste trabalho, apresenta-se uma revisão dos principais marcadores genéticos relacionados ao vírus e ao hospedeiro que podem ser utilizados para avaliar a evolução da infecção.

Host and viral factors may influence the course of human immunodeficiency virus-1 (HIV-1) infection. Theviral factors are related to circulating subtype, tropism, cytopathogenicity, antigenicity, and viral genotypemutations that prompt the resistance against the drugs used in the current therapy. In this situation, thevariability patterns of HIV-1 genomic sequences can be used as genetic markers to evaluate the trend ofinfection course and the effectiveness of the treatment. On the other hand, the determining factors related tothe host include HLA genotype, manufacture of neutralizing antibodies, and the presence of genetic mutationsthat make difficult the interaction of virus with the host cell. Genomic analyses can be useful in the sense ofassuring the phenotype presence, which predisposes to the development of the infection. In this study wepresent a review of the major genetic markers related to the virus and to the host that can be applied toevaluate the course of infection.

Rastreamento familiar do fator V de Leiden: a importância da deteccão de portadores heterozigotos / Familiar tracking of factor V Leiden: the importance of detection in heterozygous carriers

O fator de Leiden é uma mutacão genética que predispõe seus portadores ao tromboembolismo venoso. O objetivo do estudo foi investigar a distribuicão dos alelos em 21 membros da família de três pacientes portadores de trombose com a presenca da mutacão do fator V de Leiden. A deteccão da mutacão no gene do fator V foi realizada entre portadores da mutacão no estado heterozigoto. Este estudo foi realizado no Centro de Hematologia e Hemoterapia do Ceará - Hemoce. Observou-se a presenca da mutacão no estado heterozigoto na família 1 (83,3 por cento), na família 2 (40 por cento) e na família 3 (50 por cento). No total de 24 membros (pacientes e familiares) analisados, 50 por cento (12/24) apresentaram a mutacão, todos no estado heterozigoto, 66,7 por cento (8/12) não apresentaram trombose. A deteccão do fator V de Leiden em pacientes portadores de eventos trombóticos é recomendado para esclarecimento das causas e para efetuar o rastreamento em membros de sua família, ainda sem o aparecimento de eventos trombóticos, de forma a avaliar os riscos associados e assim determinar um acompanhamento médico preventivo.

Análise de regiöes repetitivas do genoma como parâmetro de avaliaçäo da "pega" do TMO-Alogênico e do Status quimérico / Analysis of repetitive regionsof the genome as a parameterfor evaluation of engraftement of allogenic bone marrow transplant and chymeric state

As VNTRs (Variable Number in Tandem Repeats) säo regiöes do genoma, näo codificadoras de proteínas, as quais constituem excelentes fontes de variabilidade genética por apresentarem alto polimorfismo no que se refere ao número de repetiçöes seqüenciais de blocos de DNA. O estudo destas regiöes pela técnica de RFLP (Restriction Fragment Lengh Polimorphism) vem se mostrando útil no monitoramento da "pega" da medula óssea pós TMO-alogênico. Foram analisadas quatro pacientes com diagnóstico de LMC em fase crônica e outro com síndrome mielodisplásica - RAEB, todos adultos, submetidos a transplante de medula óssea alogênico, HLA - idênticos e MLC-negativa. Foi possível demonstrar a "pega" da medula óssea e definir o quimerismo hematopoiético em todos os casos estudados.

Controle de qualidade de Concentrados de Plaquetas (CP) / Quality control in Platelet Concentrade (PC)

A obtençäo de hemocomponentes lábeis, seu controle e importância na prática hemoterápica tem merecido especial atençäo dos profissionais da saúde em todo mundo. Visando a atingir qualidade - Programa Hemocentro 2000 - objetivou-se estandardizar a produ_o de concentrado de plaqueta (CP) que estivesse dentro dos padröes internacionais descritos. Neste sentido, os seguintes parâmetros foram monitorados: 1) calibraçäo sistemática dos equipamentos envolvidos no processo; 2) determinaçäo do tempo ideal de coleta de sangue para produçäo de CP; 3) escolha do melhor método de determinaçäo de pH, volume e hematimetria. Os resultados obtidos levaram à reformulaçäo dos procedimentos técnicos adotados. Constatou-se que: 1) a instalaçäo do controle de qualidade no serviço gerou certa animosidade que dificultou em parte a obtençäo dos dados; 2) na validaçäo do equipamento, concluiu-se que a centrífuga produzida no Brasil näo velocidades exigidas pela técnica de calibraçäo, näo sendo , portanto, indicada para este fim; 3) foram monitorados diferentes intervalos de tempo, sendo que os CPs produzidos a partir de sangue total colhido em intervalo de tempo inferior a 8 minutos, deram os melhores resultados; 4) determinou-se o pH por três diferentes métodos: pHmetro(pHMeter HM-6A) e aparelho de gasometria NOVA Star Profile Plus 5. A determinaçäo do pH pelo método de fita, simples, rápido, de baixo custo deu os mesmos resultados dos dois métodos comparativos, sendo indicado seu uso antes da liberaçäo imediata do hemocomponente; 5) após determinaçäo de centrífuga que teve melhor desempenho, definiu-se o melhor técnico, concluindo que este corresponde ao único técnico de nível superior da equipe. Estes resultados, estatisticamente validados, apontam para indiscutível necessidade do investimento continuado para qualificaçäo de recursos humanos